稳转细胞株构建及检测
8858cc永利官网提供定制化的编辑方案，可应用于多种细胞场景，支持RNP、慢病毒、质粒等多样化递送方式，以及多维度检测方法，为您提供高效、稳定的细胞株构建与检测服务。
服务内容：
基因敲除/敲入稳转株构建，基因激活/沉默稳转株构建和点突变稳转株构建。
| 实验流程 | 服务内容 | |
|---|---|---|
| 1.基因编辑方案设计 |
从多维度考量，提供定制化编辑方案 靶位点选择：CDS或非编码区； Cas表达形式：质粒、mRNA、蛋白； 报告基因：GFP、mCherry、Luc等 |
设计sgRNA、donor DNA和相关载体 sgRNA：基于靶位点筛选高效sgRNA； donor DNA：综合考虑编辑位点、目的、片段长度和形式（ssDNA/dsDNA/质粒）等因素，选择高效donor DNA |
| 2.细胞培养与转染 |
应用于多种细胞场景 T细胞、NK细胞、iPSCs等； |
多样化高效递送 Viral-based （LV、AAV）、合成材料（LNPs、GNPs）、物理方法（电穿孔） |
| 3.转染后细胞的鉴定与检测 |
多维度检测编辑效率 核酸水平：、ddPCR、RT-qPCR、T7E1酶切； 蛋白：FACS、Western Blot、ELISA等 |
细胞活率及特定功能检测 细胞活率：台盼蓝染色法、CCK-8法、流式细胞检测； 包括表面标志性抗原：CD3、PC-1、CD34等 特定功能：T细胞杀伤功能、干细胞多能性检测 |
| 4.细胞系交付 |
多样的细胞交付形式 多克隆细胞群、单克隆细胞株； 提供细胞基因型复检、扩增及冻存服务 |
详实的交付报告 涉及的序列、实验记录、检测结果 |
一般工作流程：
基于CRISPR/Cas基因编辑体系：
Knock out/Knock in (敲除/敲入)、CRISPRi/a （沉默/激活）、Base Editor（碱基编辑）、Primer Editor（先导编辑）、表观遗传调控
可适用于不同细胞应用场景：
基于高效稳定的细胞转染系统和基因编辑系统，8858cc永利官网成功在不同细胞系实现基因编辑，包括但不限于T细胞，TIL细胞，NK细胞，iPSCs和HSPCs等。
交付内容：
| 稳定细胞系： |
多克隆细胞群或单克隆细胞株；提供细胞基因型复检、扩增及冻存服务 |
| 交付报告： |
涉及的序列、实验记录、检测结果 |
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